是用EGFP標(biāo)記的重組人Annexin V來(lái)檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰絲氨酸的一種細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒??梢允褂昧魇郊?xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷酯結(jié)合蛋白,參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。
本試劑盒還提供了碘化丙啶染色液,碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,呈現(xiàn)紅色熒光。對(duì)于壞死細(xì)胞,由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失,Annexin V-EGFP可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi),與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷酯酰絲氨酸結(jié)合,從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。
1.靈敏度高,背景干擾?。?/div>
2.可在組織及單細(xì)胞中檢測(cè)低水平凋亡;
3.后續(xù)進(jìn)行流式、熒光顯微鏡檢測(cè),對(duì)細(xì)胞凋亡進(jìn)行定量;如聯(lián)合使用耦合顯色酶的抗熒光素抗體,能將熒光信號(hào)轉(zhuǎn)化為比色信號(hào),用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行檢測(cè)。
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒的注意事項(xiàng):
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-EGFP,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。