傳染性支氣管炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,產(chǎn)品僅用于科研經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:傳染性支氣管炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Infectious Bronchitis Virus(IBV)RTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
葒草苷中文別名: 葒草素 英文名: Orientin CAS登錄號(hào): 28608-75-5 分子式: C21H20O11 分子量: 448.01
哈巴俄苷中文別名: 哈巴脂苷 英文名: Harpagoside CAS登錄號(hào): 19210-12-9 分子式: C24H30O11 分子量: 494.18
(-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名: (-)-Syringaresnol-4-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside CAS登錄號(hào): 136997-64-3 分子式: C33H44O17 分子量: 712.26 分子結(jié)構(gòu):
D-四氫藥根堿英文名: (R)-(+)-Corypalmine 英文別名: dl-Tetrahydrojatrorrhizine CAS登錄號(hào): 13063-54-2 分子式: C20H23NO4 分子量: 341.16
甘油三油酸酯中文別名: 甘油三酸酯 英文名: Glycerine trioleate 英文別名: Trioleoylglyceride; Trioleoylglycerol CAS登錄號(hào): 122-32-7 分子式: C57H104O6
紫花前胡苷中文別名: 紫花前胡甙; 鬧達(dá)可寧 英文名: Nodakenin 英文別名: (+)-Marmesinin CAS登錄號(hào): 495-31-8 分子式: C20H24O9
原兒茶酸中文別名: 3,4-二羥基苯甲酸 英文名: 3,4-Dihydroxybenzoic acid 英文別名: Protocatechoic acid;4-Carboxy-1,2-dihydroxybenzene CAS登錄號(hào): 99-50-3 分子式: C7H6O4
印烏中文別名: 印烏堿 英文名: Indaconitin 英文別名: Acetylbenzoylpseudaconine; Acetylbenzoylpseudoaconine CAS登錄號(hào): 4491-19-4 分子式: C34H47NO10
異去氫鉤藤堿中文別名: 異柯諾辛因堿 英文名: Isocorynoxeine CAS登錄號(hào): 51014-29-0 分子式: C22H26N2O4 分子量: 382.19
異葒草苷中文別名: 異紅草素,高東方蓼黃素,異葒草甙 英文名: luteolin-6-C-glucoside 英文別名: Isoorientin;Homoorientin;lespecapittoside CAS登錄號(hào): 4261-42-1 分子式: C21H20O11
野百合堿中文別名: 單響尾蛇毒蛋白; 大葉豬尿青堿; 農(nóng)吉利堿; 豬屎豆堿 英文名: Crotaline 英文別名: Monocrotaline CAS登錄號(hào): 315-22-0 分子式: C16H23NO6
傳染性支氣管炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒CBZ-甘氨酸,100gAlloy Wood’s Metal 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CBZ-甘氨酸,25gMyristoyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
CBZ-甘氨酸,500gTHEAFLAVINE(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,JAK1/2抑制劑
CBZ-L-羥脯氨酸,100g2-Bromo-5-hydroxypyridine 質(zhì)量規(guī)格:>97%,CDKs/JAK2 / FLT3抑制劑
CBZ-L-羥脯氨酸,25gDIISOPROPYLCARBAMOYL CHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CBZ-L-羥脯氨酸,5gD(+)-Malic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CBZ-L-脯氨酸,100gN-Acetyl-D-galactosamine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
CBZ-L-脯氨酸,25gMorpholineborane 質(zhì)量規(guī)格:>98%TGF-β抑制劑
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