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背景：

巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(Macrophage Migration Inhibitory Factor, MIF)是一種多效的細(xì)胞因子，以同型三聚體的形式存在于體內(nèi)。MIF初被鑒定為抑制巨噬細(xì)胞遷移的T細(xì)胞衍生因子。近年來，MIF因其在血管生成和腫瘤發(fā)生發(fā)展中的可能作用而受到越來越多的關(guān)注。腫瘤內(nèi)MIF的表達(dá)與血管生成生長(zhǎng)因子如白細(xì)胞介素8 (IL-8)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá)密切相關(guān)，并且與腫瘤切除術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)。

標(biāo)記：

1.將細(xì)胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基。

2.提前將2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后將150微升2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基與等體積細(xì)胞培養(yǎng)基混合，獲得1×EdU溶液。

【注】：①不建議替換全部培養(yǎng)基，這樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度。②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜。

3.孵育細(xì)胞2 h，棄培養(yǎng)基。

【注】：①培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)。②大多數(shù)腫瘤細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2 h的孵育時(shí)間。

4.以1xPBS清洗細(xì)胞兩次，每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。

【注】：對(duì)于貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1. 將細(xì)胞以 104-105 個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種在 96 孔板 中，加入 100μL 培養(yǎng)基，含或不含待測(cè)化合物。在 CO2 培養(yǎng)箱中在 37℃ 下培養(yǎng)細(xì)胞 24 小時(shí)。

2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。

3. 在培養(yǎng)箱中將培養(yǎng)板培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間（如 6、12、24 或 48 小時(shí)）。

4. 向板的每個(gè)孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。

5. 將平板在培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時(shí)。

6. 在讀板之前，在定軌振蕩器上輕輕混勻。

7. 使用酶標(biāo)儀測(cè)量 450nm 處的吸光度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-7/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (抗原)

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)

REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 Protein

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

羊表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA 試劑盒

Human ai epidemic hemorrhagic fever virus IgM aibody (EHF) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM (EHF)檢測(cè)試劑盒

Humanacetylcholine,ACHELISAKit 人乙酰(ACH)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforADAM8(MouseADisiegrinAndMetalloprotease8)ELISAKIT小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8

血液脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(LPPLA2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)檢測(cè)試劑盒

乙酰轉(zhuǎn)移酶   英文名稱：   Rat acetylansferase   規(guī)格：      英文縮寫：   ChAT

大鼠降鈣素   英文名稱：   calcitonin   規(guī)格：      英文縮寫：   CAL

大鼠環(huán)0酸腺苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：      英文縮寫：   CAMP

大鼠環(huán)0酸鳥苷   英文名稱：   Cyclic guanosine monophosphate   規(guī)格：      英文縮寫：   cGMP

重組人巨噬細(xì)胞遷移抑制因子（MIF）FKBP1A重組小鼠 FKBP12 / FKBP1A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Bassoon(BSN 0.5mgBassoon(BSN)

PTPRJ重組人 DEP1 / PTPRJ 蛋白 (aa 997-1337, His 標(biāo)簽) Protein

CA5B Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VB / CA5B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CDH1 Protein Rat 重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白

大鼠活化素B(ACV-B)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ACV-B ELISA Kit

Rabbit cystatin / cystatin C (Cys-C) ELISA Kit 兔半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測(cè)試劑盒

桿菌(BA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子

體液元素比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitColⅣ人Ⅳ型膠原