y79人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

G Protein alpha Inhibitor 1： G蛋白α抑制蛋白1抗體 CLMP Others Mouse 小鼠 ASAM / ACAM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0253A-427(人肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.3ml

GAS 6： 生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6抗體 AGS人胃腺癌細(xì)胞 Human

NHDF Pellet 正常人皮膚成纖維細(xì)胞團(tuán)塊(少年者) > 1 mio.cells 0酸(pNPP)0酸酶檢測(cè)試劑盒pNPP 人抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒 IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 2ml

Glutathione Synthetase： 合成酶抗體 小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1

小鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 TAP  大鼠原激活肽 96T

NR2E3： 核受體蛋白NR2E3抗體 EL4. IL-2細(xì)胞，淋巴瘤細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,Loo細(xì)胞 CM-H037人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

EGFR Others Mouse 小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠嗜酸性粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶(EPO)ELISA試劑盒 CFH  大鼠補(bǔ)體因子H 96T

NEK8： 絲酸/蘇酸蛋白激酶NEK8抗體 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-sf

F98大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 F98 rat glioma cells DMEM+10%FBS 大鼠嗜酸細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 FAS/CD95(Human Factor-related Apoptosis)  人凋亡相關(guān)因子 96T

y79人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞IGSF3： 超家族成員3抗體 獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4 人軟組織纖維瘤細(xì)胞，TE 115.T細(xì)胞 Eca-109(食管癌細(xì)胞)

IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人α-內(nèi)肽(α-EP)ELISA 試劑盒 SATB1(special AT-rich sequence binding protein) 核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗原 0.5mg

IGSF6： 超家族成員6抗體 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7

B16-Fo細(xì)胞，鼠黑色素瘤細(xì)胞系 WI-38(胚肺細(xì)胞) 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE) 人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)ELISA 試劑盒 SCF (Stem Cell Factor) 干細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗原 0.5mg

IGSF9： 超家族成員9抗體 CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。