型 號
產(chǎn)品時間2024-12-05
所屬分類其它細(xì)胞系
報價1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度,當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時,即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞 | 組織來源 | 腎;SV40轉(zhuǎn)染 |
種屬 | 猴 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
支原體檢測 | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
細(xì)胞別稱 Cos-1; COS1; Cos1; 基因表達(dá)情況;T antigen, This is an African green monkey kidney fibroblast-like cell line suitable for transfection by vectors requiring expression of SV40 T antigen. The cells are EBNA negative, negative for Fc receptors and negative for complement receptors. 背景介紹;COS-1細(xì)胞源自CV-1細(xì)胞,經(jīng)帶有編碼野生型T抗原的起始失活突變的SV40轉(zhuǎn)染得到。COS-1細(xì)胞含有一個來自SV40基因組全部早期區(qū)域的組成型拷貝。 生物安全等級;2 細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管 支原體檢測;無 保藏機(jī)構(gòu);ATCC; CRL-1650 BCRC; 60002 BCRJ; 0070 DSMZ; ACC-63 ECACC; 88031701 培養(yǎng)基;90%DMEM+10% FBS 培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時,即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。
(4)消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
(5)細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?,?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Mouse 17 hydroxyprogesterone (17-OHP) ELISA Kit 小鼠17羥孕(17-OHP)ELISA試劑盒
大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 ,英文名: FSH ELISA Kit
ELISA 小鼠N端前腦素(mouse -proBNP) 48T/96T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLHRH(MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone)ELISAKit小鼠黃體生成素釋放激素規(guī)格:48T/96T
通用型HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性檢測試劑盒20次
人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)免疫試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit
猴痘病毒(MPV)檢測試劑盒 48T
HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISA試劑盒人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISAKitTNF-β小鼠腫瘤壞死因子β規(guī)格:48T/96T
ELISAKitEBV人抗EB病毒抗體規(guī)格:48T/96T
大鼠合成酶(NOS)ELISA試劑盒 ,英文名: NOS ELISA Kit
人真胰島素(TI)ELISA檢測試劑盒Humanueinsulin,TIELISAKit 96T/48T
大鼠α1抗胰前體(pre-α1-AT)免疫試劑盒 Rat α1-Aiypsin Precursor,pre-α1-AT ELISA Kit
CLIAKitforSS(HumanSomatostatin)ELISAKit人規(guī)格:48T/96T
腫瘤/睪丸抗原27抗體(高遷移率族蛋白)
谷甘肽S轉(zhuǎn)移酶ω2抗體
溶質(zhì)載體家族25成員43抗體
MERTK重組兔單克隆抗體
下頜發(fā)育不良綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體
白介素1α/IL-1α抗體
磷酸化E3泛素蛋白連接酶COP1抗體
CD32B重組兔單克隆抗體
COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞血管生成素相關(guān)蛋白6抗體
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